Kỹ thuật điện sinh lý cổ điển

Nguyên tắc và cơ chế

Điện sinh lý học là một nhánh của sinh lý học liên quan đến dòng ion (dòng ion) trong các mô sinh học và đặc biệt là các kỹ thuật ghi điện cho phép đo dòng chảy này. Kỹ thuật điện sinh lý cổ điển liên quan đến việc đặt các điện cực vào các chế phẩm khác nhau của mô sinh học. Các loại điện cực chính là:

1. dây dẫn rắn đơn giản, chẳng hạn như đĩa và kim (đĩa đơn hoặc mảng, thường được cách điện ngoại trừ đầu mút),
2. dấu vết trên bảng mạch in hoặc polyme linh hoạt, cũng được cách điện ngoại trừ đầu mút và
3. ống rỗng chứa đầy chất điện phân, chẳng hạn như pipet thủy tinh chứa đầy dung dịch kali clorua hoặc dung dịch điện phân khác.

Các chế phẩm chính bao gồm:

1. các sinh vật sống,
2. mô bị cắt bỏ (cấp tính hoặc nuôi cấy),
3. các tế bào phân tách từ mô bị cắt bỏ (cấp tính hoặc nuôi cấy),
4. tế bào nhân tạo hoặc mô, hoặc
5. lai tạo các yếu tố ở trên.

Nếu một điện cực có đường kính đủ nhỏ (micromet), thì nhà điện sinh lý học có thể chọn chèn đầu mút vào một tế bào. Cấu hình như vậy cho phép quan sát và ghi lại trực tiếp hoạt động điện nội bào của một tế bào. Tuy nhiên, thiết lập xâm lấn này làm giảm tuổi thọ của tế bào và gây rò rỉ các chất trên màng tế bào. Hoạt động nội bào cũng có thể được quan sát bằng cách sử dụng pipet thủy tinh được tạo hình đặc biệt (rỗng) có chứa chất điện phân. Trong kỹ thuật này, đầu pipet siêu nhỏ được ép vào màng tế bào, mà nó tuân thủ chặt chẽ bởi sự tương tác giữa thủy tinh và lipit của màng tế bào. Chất điện phân trong pipet có thể được đưa vào liên tục chất lỏng với tế bào chất bằng cách cung cấp một xung áp suất âm cho pipet để phá vỡ các mảng nhỏ của màng được bao quanh bởi vành pipet (ghi toàn bộ tế bào). Ngoài ra, tính liên tục của ion có thể được thiết lập bằng cách "đục lỗ" miếng vá bằng cách cho phép chất tạo lỗ chân lông ngoại sinh trong chất điện phân tự chèn vào miếng vá màng (ghi bản vá đục lỗ). Cuối cùng, miếng vá có thể được giữ nguyên (ghi bản vá).

Các nhà nghiên cứu điện sinh lý có thể chọn không chèn đầu mút vào một tế bào. Thay vào đó, đầu điện cực có thể được để lại liền liên tục với không gian ngoại bào. Nếu đầu mút đủ nhỏ, cấu hình như vậy có thể cho phép quan sát và ghi lại các tiềm năng hành động gián tiếp từ một ô duy nhất, được gọi là ghi đơn vị. Tùy thuộc vào sự chuẩn bị và vị trí chính xác, một cấu hình ngoại bào có thể nhận hoạt động của một số tế bào gần đó đồng thời, được gọi là ghi nhiều đơn vị.